Indicador De Agar De Sulfito De Bismuto Forex

CRITÉRIO BISMUTH SULFITE AGAR DESTINO AO USO Hardy Diagnostics CRITÉRIO Bismuth Sulfite Agar é um meio altamente seletivo e diferencial. Recomenda-se o isolamento de espécies de Salmonella, especialmente S. typhi. De alimentos e espécimes clínicos. Este meio de cultura desidratado é uma matéria-prima destinada a ser utilizada na fabricação de produtos de mídia preparados, que exigirá processamento adicional, ingredientes adicionais ou suplementos. A salmonelose continua a ser um importante problema de saúde pública nos Estados Unidos e em todo o mundo. Apesar dos esforços para controlar a ocorrência de Salmonella em animais domesticados, Salmonella são patógenos primários de muitos animais (por exemplo, aves, vacas, porcos, répteis, etc.) e são a principal fonte de salmonelose não-tifóidea em humanos. (12) As infecções humanas com Salmonella são mais comumente causadas pela ingestão de alimentos, água ou leite contaminados fecalmente. O manuseio inadequado de produtos de aves de capoeira é muitas vezes a causa da gastroenterite relacionada à Salmonella, com cerca de metade das epidemias de salmonelose causadas por produtos de aves de capoeira e aves de capoeira contaminados. Salmonella não tifóide geralmente causa uma infecção intestinal acompanhada de diarréia, febre e cólicas abdominais. Normalmente, é leve e auto-limitante, muitas vezes durando uma semana ou mais. Todas as idades são afetadas, sendo a maior incidência em lactentes. (2,5,12) Febre tifóide, causada por S. typhi. É uma infecção grave da corrente sanguínea comum nos países em desenvolvimento. É raro nos Estados Unidos e os casos mais relatados estão relacionados a viagens no exterior. A febre tifóide geralmente apresenta febre alta sustentada e debilitante e dor de cabeça, sem diarréia. Há um período de incubação longo e altamente variável (1 a 6 semanas). É transmitido por contato pessoa a pessoa ou com alimentos e água contaminados fecalmente. (2) Os seres humanos são o único reservatório conhecido para S. typhi. (5) No teste de alimentos, o Agar de Sulfito de Bismuto é especificado como uma das mídias altamente seletivas para o isolamento de espécies de Salmonella a partir de produtos lácteos. O leite cru tem sido associado a surtos humanos envolvendo Salmonella. A infecção por salmonela no gado leiteiro é comum e foram relatados surtos de salmonelose bovina. O gado leiteiro pode adquirir infecção por Salmonella de uma variedade de fontes, incluindo alimentos contaminados ou água. Salmonella é incapaz de sobreviver à pasteurização. Portanto, sua presença em leite pasteurizado é geralmente causada por transformação incorreta ou contaminação pós-pasteurização. (12) O Agar de Sulfito de Bismuto é seletivo devido à presença de inibidores e é diferencial com base na produção de sulfeto de hidrogênio. (13) O extrato de carne e as peptonas fornecem nitrogênio, vitaminas e minerais. Dextrose é uma fonte de energia. O sulfito de bismuto e o verde brilhante são agentes seletivos, inibindo a maioria dos organismos Gram-positivos e gram-negativos comensais além das espécies de Salmonella e algumas espécies de Shigella. O sulfato ferroso é um indicador para a produção de sulfeto de hidrogênio, que ocorre quando o H 2 S produzido por Salmonella reage com o sal de ferro. Esta reação provoca uma colônia metálica negra ou verde e precipitação marrom ou preta. (2) Gram peso por litro: pH final 7,5 - 0,2 a 25ordMC. Ajustado e complementado conforme necessário para atender aos critérios de desempenho. ARMAZENAGEM E VIDA ÚTIL Conservar o (s) frasco (s) selado (s) contendo meio de cultura desidratado a 2-30ord. O meio de cultura desidratado é muito higroscópico. Mantenha a tampa bem fechada. Proteja os meios de cultura desidratados da umidade e da luz. Os meios de cultura desidratados devem ser descartados se não estiverem fluindo ou se a cor mudou de seu bege esverdeado original. Armazene os meios de cultura preparados em 2-8ordMC. MÉTODO DE PRECAUÇÕES DE PREPARAÇÃO PARA MÍDIA DE CULTURA DESLIDIDA 1. Suspender 52,0 g dos meios de cultura desidratados em 1 litro de água destilada ou desionizada. Mexa para misturar bem. 2. Aquecer até ferver para dissolver completamente, aproximadamente 1 minuto. Não superaqueça. 3. Não se autoclave. 4. Resfriar a 45-50ordmC. 5. Misture bem antes de verter em placas de Petri. Use placas derramadas no mesmo dia. PROCEDIMENTO E INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS Para informações sobre procedimentos e interpretação dos resultados, consulte as referências listadas. LIMITAÇÕES A incubação de placas de agar de sulfato de bismuto a temperaturas mais elevadas (isto é 43ordmC) pode resultar em pequenas e atípicas colônias de Salmonella. Em alguns casos, temperaturas mais altas também reduzirão a sensibilidade do método e também mostrarão recuperações significativamente mais baixas. (6) As colônias típicas de S. typhi geralmente se desenvolvem dentro de 24 horas, no entanto, todas as placas devem ser incubadas por 48 horas para permitir o crescimento de todas as cepas de febre tifóide. (13) As placas Agar de Sulfito de Bismuto não devem ser armazenadas refrigeradas (2-8ordemC) por mais de 2 dias. Após 3 dias de armazenamento há uma redução da seletividade da mídia, diminuindo o número de Salmonella recuperada. Recomenda-se a utilização de placas de agar de sulfato de bismuto no dia preparado. (13) A maioria das espécies de Shigella geralmente são inibidas no Agar de Sulfito de Bismuto, no entanto, S. flexneri e S. sonnei podem exibir crescimento. (13) S. typhi e S. arizonae são os únicos organismos entéricos a exibir zonas coloridas típicas no meio, embora, S. Arizonae geralmente é inibida. Outros membros das Enterobacteriaceae não produzem zonas castanhas. (13) É importante traçar colônias bem isoladas em áreas de crescimento intenso. S. typhi parece verde claro e pode ser interpretado como crescimento negativo para S. typhi. (13) As colónias sobre o Agar de Sulfito de Bismuto podem estar contaminadas com outros organismos viáveis, portanto, colônias isoladas devem ser subcultivadas em um meio menos seletivo (isto é, Agar MacConkey). (13) MATERIAIS NECESSÁRIOS, MAS NÃO FORNECIDOS Os fornecimentos e equipamentos microbiológicos padrão, como autoclaves, incineradores e incubadoras, etc. não são fornecidos. CONTROLO DE QUALIDADE CRITÉRIO DE APARÊNCIA FÍSICA O pó de agar de sulfato de bismuto deve aparecer homogêneo, de fluxo livre e de cor bege esverdeada. A mídia preparada deve parecer opaca, com um precipitado floculante e cor cinza-verde. REFERÊNCIAS 1. Anderson, N. L. Et al. Cumitech 3B Quality Systems no Laboratório de Microbiologia Clínica, Coordenação de ed. COMO. Weissfeld. Sociedade Americana de Microbiologia, Washington, DC 2. Jorgensen. Et al. Manual de Microbiologia Clínica, American Society for Microbiology, Washington, D. C. 3. Tille, P. et al. Bailey e Scotts Diagnostic Microbiology, C. V. Mosby Company, St. Louis, MO. 4. Isenberg, H. D. Manual de Procedimentos de Microbiologia Clínica, Vol. I, II amp III. Sociedade Americana de Microbiologia, Washington, DC 5. Koneman, E. W. et al. Atlas de cores e livro de texto de Microbiologia de diagnóstico, J. B. Lippincott Company, Filadélfia, PA. 6. Comitê Técnico da APHA sobre Métodos Microbiológicos para Alimentos. Compêndio de métodos para o exame microbiológico de alimentos, APHA, Washington, D. C. 7. Administração de alimentos e drogas dos EUA. Manual Analítico Bacteriológico. AOAC, Arlington, VA. Fda. govFoodFoodScienceResearchLaboratoryMethodsucm2006949.htm. 8. Atlas, R. M. 1997. Manual de mídia microbiológica. 2ª ed. CRC Press, Inc. Boca Raton, Flórida. 9. MacFaddin, J. F. Testes bioquímicos para identificação de bactérias médicas,. Lipincott Williams Wilkins, Filadélfia, PA. 10. Wilson, James W. e E. M.MV. Blair. 1926. Uma combinação de Bismuto e Sulfito de Sódio proporcionando um meio de enriquecimento e seletivo para os grupos de bactérias Tifo-Paratifóide. O Journal of Pathology and Bacteriology 29: 310-311. 11. Hajna, A. A. E S. R. Damon. 1956. Novos meios de enriquecimento e revestimento para o isolamento de organismos de Salmonella e Shigella. Microbiologia Aplicada. 4: 341-345. 12. Marshall, R. T. Ph. D. 1993. Métodos Padrão para o Exame de Produtos Lácteos. 16ª ed. Associação Americana de Saúde Pública, Washington, D. C. 13. MacFaddin, J. F. 1985. Mídia para Isolamento, Cultivo, Identificação, Manutenção de Bactérias. Vol. I. Williams amp Wilkins, Baltimore, MD. ATCC é uma marca registrada da American Type Culture Collection. Para este organismo Outros produtos utilizados no isolamento de Salmonella. CM0201 Agar de sulfito de bismuto (Modified Wilson Blair Medium) CM1091 ​​ONE Broth-Salmonella Base CM1092 Brilliance Salmonella Agar CM1112 MODIFIED SEMI-SOLID RAPPAPORT VASSILIADIS AGAR (ISO) QB0003 DuPont QUALICON BAX SYSTEM Q7 QB0608 BAX SALMONELLA Kit (96 testes) BO0201 BUFFERED PEPTONE WATER PO0164 XLD MEDIUM PO0171 BRILHANTE GREAR AGAR (MODIFICADO) PO1132 XLD AGAR (EP, USP, JP, BP) PO5098 BRILHANTE SALMONELLA AGAR Meios de cultura desidratados Ajustados conforme necessário para atender aos padrões de desempenho Instruções Suspender 20g em 500ml de água destilada em um frasco de 1 litro. Aquecer suavemente com agitação frequente até que o meio apenas comece a ferver e cozinhe por 30 segundos para dissolver o agar. Arrefecer até 50-55degC, misture bem para dispersar a suspensão e despeje as placas grossas (25 ml de meio por placa). Permita que o meio se solidifique com o prato descoberto. Maiores volumes podem ser preparados se houver grande cuidado e espaço de espaço adequado. Seque as placas antes de usar, mas tenha cuidado para evitar o excesso de tinta. As placas corretamente preparadas devem ter uma opacidade suave e cremosa com uma cor de palha pálida. Não deve haver sedimentação do indicador. NÃO EXPLOSIVA - NÃO AUTOCLAVE Descrição O Agar de sulfito de bismuto é uma modificação do meio seletivo Wilson e Blair 1 para o isolamento e identificação preliminar de Salmonella typhi e outras salmonelas de material patológico, esgoto, abastecimento de água, alimentos e outros produtos suspeitos de Contendo esses agentes patogênicos. Neste meio, o sulfito de bismuto recém-precipitado atua junto com o verde brilhante como agente seletivo, suprimindo o crescimento de coliformes, permitindo o crescimento de salmonelas. Os compostos de enxofre fornecem um substrato para a produção de sulfureto de hidrogênio, enquanto os sais metálicos no meio mancham a colônia e o meio circundante, preto ou marrom, na presença de sulfato de hidrogênio. As colônias atípicas podem aparecer se o meio estiver fortemente inoculado com matéria orgânica. Tal situação pode ser prevenida suspendendo a amostra em solução salina estéril e utilizando o sobrenadante para inoculação. O meio recentemente preparado tem uma forte ação inibitória 2 e é adequado para amostras fortemente contaminadas. Armazenar as placas derramadas a 4degC por 3 dias faz com que o meio mude de cor para verde, tornando-o menos seletivo com um pequeno número de salmonelas sendo recuperadas 3. No entanto, para a recuperação de Salmonella typhi, a última técnica não é recomendada 4. Onde o número de salmonelas deve ser pequeno, podem ser empregados métodos de enriquecimento. O uso deste meio é defendido por várias autoridades 5,6,7. Técnica O Agar de sulfito de bismuto pode ser usado em conjunto com outros ácidos entéricos seletivos para o isolamento de salmonelas por revestimento direto ou a partir de meios de enriquecimento 8. Assim, o seguinte esquema pode ser adotado. Inocular diretamente sobre o Agar de sulfito de bismuto e um ou mais dos seguintes itens: Agente de desoxicolato Citrato CM0227 ou DCLS Agar CM0393 XLR Agar CM0469 Agar verde brilhante CM0329 MacConkey Agar No.3 CM0115 Ao mesmo tempo, inocule um caldo de enriquecimento, como Selenite Broth Base CM0395 Biselenite de sódio LP0121, Caldo de tetrathionato Mueller-Kauffmann CM0343 ou Mueller-Kauffmann Caldo de tetrathionate-Novobiocin (MKTT-n) CM1048. Subcultura no Agar de Sulfito de Bismuto e qualquer outro meio seletivo após 12-18 horas de incubação. Examine as placas após 18 horas de incubação e colônias suspeitas de subcultura para meios de identificação, p. ex. Kligler Iron Agar CM0033. Todas as placas negativas devem ser incubadas durante 48 horas. Salmonella typhi Aparência Colônias de coelho-eyersquo preto com uma zona preta e brilho metálico em torno da colônia após 18 horas. Uniformamente preto após 48 horas de incubação. Outras espécies de Salmonella Aparência Aparência variável da colônia após 18 horas, podem ser pretas, verdes ou claras e mucóides. As colonias uniformemente pretas são vistas após 48 horas, muitas vezes com coloração generalizada do meio e um brilho metálico pronunciado. Outros organismos. por exemplo. Bactérias coliformes, espécies de Serratia, Proteus Aparência Normalmente inibidas, mas as cepas ocasionais dão colônias verdes ou castanhas maçantes sem brilho metálico ou coloração do meio circundante. Condições de armazenamento e tempo de validade Armazene o meio desidratado a 10-30degC e use antes do prazo de validade no rótulo. Observe os seguintes comentários: devido ao seu conteúdo de substâncias reativas e higroscópicas, o Agar de sulfito de bismuto desidratado rapidamente se deteriora quando exposto à atmosfera. Isso geralmente é indicado pela agregação em uma massa sólida não friável e pelo desenvolvimento de uma coloração marrom. O meio reconstituído a partir desse material é marrom, não se torna verde no armazenamento e é caracterizado por perda de propriedades diferenciais e seletivas. Por este motivo, o pó deve ser armazenado em local fresco e seco e após o uso, o recipiente deve ser devidamente fechado. Meio preparado As placas preparadas não devem ser armazenadas por mais de dois dias a 2-8 ° C, após o que o verde brilhante se oxoidiza para dar um meio verde que pode ser inibidor de algumas salmonelas. Aparência Meio desidratado: Pó de cor verde clara, fluido livre Meio preparado: Gel de cor verde pálido Controle de qualidade Salmonella typhi deve ser usada somente em um laboratório de Classe 3, não para testes de rotina ou em laboratórios de alimentos.